Реферат: Методом сайт-направленного мутагенеза на основе плазмиды pETL7, кодирующей люциферазу светляков Luciola mingrelica со вставкой His6 на С-конце, получены мутантные формы люциферазы, несущие единичные (C62S, C62V, C86S, C146S, C164S), двойные (C62/146S, C62/164S, C86/146S и C146/164S), а также тройную замену C62/146/164S. Мутации не повлияли на спектры биолюминесценции и флуоресценции фермента. Для мутантов C86S, C86/146S, C62/164S и C62/146/164S величины KATPm и KLH2m увеличились в 1,5-1,9 раза, заметно снизились уровень экспрессии, удельная активность и термостабильность фермента. Для остальных мутантов величины KATPm и KLH2m, удельная активность и уровень экспрессии не изменились. Термостабильность мутанта C146S увеличилась в ~2 и 1,3 раза при 37 и 42° соответственно. Обсуждается возможный механизм влияния данных мутаций на структуру и свойства фермента.

Библиографическая ссылка: Модестова Ю.А. , Ломакина Г.Ю. , Угарова Н.Н.
Сайт-направленный мутагенез остатков цистеина в люциферазе светляков Luciola mingrelica
Биохимия. 2011. Т.76. №10. С.1407-1415. РИНЦ РЖ ВИНИТИ

Идентификаторы БД:

РИНЦ:	17213353
РЖ ВИНИТИ:	62 (FB06) 12.05-04Р1.360