Реферат: Методом сайт-направленного мутагенеза получены мутантные формы люциферазы светляков L. mingrelica с единичными заменами Cys62Ser и Cys146Ser. Мутации не повлияли на каталитическую активность фермента и спектры флуоресценции. Определены константы скорости быстрой (k1) и медленной (k2) стадии термоинактивации для исходного и мутантных ферментов при 37°С в отсутствие и в присутствии 12 мМ дитиотреитола (ДТТ). Показано увеличение стабильности мутантных форм люциферазы в несколько раз по сравнению с исходным ферментом - в присутствии ДТТ константа k2 для исходного фермента снижается в три раза, а для мутантных форм константы k1 и k2 практически не изменяются. Сделан вывод о том, что остатки Cys62 и Cys146 играют заметную роль в процессе инактивации люциферазы и их замены на Ser приводят к стабилизации фермента.

Библиографическая ссылка: Ломакина Г.Ю. , Модестова Ю.А. , Угарова Н.Н.
Повышение термостабильности люциферазы светляков Luciola mingrelica сайт-направленным мутагенезом неконсервативных остатков цистеина 62 и 146
Вестник Московского Университета. Серия 2: Химия. 2008. Т.49. №2. С.81-85. РИНЦ РЖ ВИНИТИ

Идентификаторы БД:

РИНЦ:	11642584
РЖ ВИНИТИ:	34 (FB04) 09.06-04Д2.56